實驗目的:此次實驗樣品為結(jié)腸癌細胞;此次實驗選用小美超聲的非接觸超聲波DNA打斷儀對微量結(jié)腸癌細胞樣品進行染色質(zhì)打斷,以便暴露出樣品裸露的核酸片段,核酸跟蛋白質(zhì)的結(jié)合,以便于樣品打斷后的后續(xù)IP驗證實驗應用,抗體和目的蛋白結(jié)合的實驗目的。
實驗前處理設備:非接觸超聲波DNA打斷儀XM-26
結(jié)腸癌細胞的前處理破碎實驗操作:
1.在實驗開始前,需要提前準備好實驗設備、實驗耗材以及實驗樣品若干
2.把預處理好的實驗樣品取出,將其裝入EP管中
3.對EP管做好標記后,需要將其放入儀器的適配器內(nèi)
4.對實驗設備的運行參數(shù)操作進行調(diào)節(jié)設置,啟動儀器,開始細胞樣品的超聲破碎打斷
實驗操作注意事項:在開始實驗前,需要等冷水機的溫度達到實驗所預設的溫度后,再啟動機器開啟儀器的運行應用。
結(jié)腸癌細胞前處理實驗破碎前:
此次實驗共用了4組程序參數(shù)做梯度實驗:
1)6H65 功率50%,工作總時長20分鐘,工作20S,間隔40s
2)6P7 功率70%,工作總時長10分鐘,工作20S,間隔20s
3)6H7功率70%,工作總時長15分鐘,工作20S,間隔20s
4)6P65功率70%,工作總時長20分鐘,工作20S,間隔20s
客戶要求片段200-800bp,6H7,6P65,6H65,其三個樣品的打斷效果均符合老師的實驗要求。
結(jié)腸癌細胞前處理實驗破碎打斷后: